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酶標(biāo)儀基本檢測(cè)原理：

光是電磁波，波長(zhǎng)100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來(lái)。綠色植物之所以是綠色，是因?yàn)橹参镂樟斯庵械募t色光譜。酶標(biāo)儀測(cè)定的原理是在特定波長(zhǎng)下，檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。檢測(cè)單位：光通過(guò)被檢測(cè)物，前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量，特定波長(zhǎng)下，同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。

檢測(cè)單位用OD值表示，OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫，表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度，OD=1og(1/trans)，其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度。OD值由下述公式計(jì)算：E=OD=C×D×E C為檢測(cè)物的濃度D為檢測(cè)物的厚度E為摩爾因子在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng)，在此波長(zhǎng)下，此物質(zhì)能夠吸收較為多的光能量。如果選擇其它的波長(zhǎng)段，就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。

因此，在測(cè)定檢測(cè)物時(shí)，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，稱為測(cè)量波長(zhǎng)。但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng)，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長(zhǎng)下，檢測(cè)物光的吸收較為小。檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

Anthos酶標(biāo)儀檢測(cè)值計(jì)算儀器中的檢測(cè)器接收透過(guò)被檢測(cè)物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號(hào)，較為大為4095。儀器定義沒(méi)有光源下的透光值為0%，沒(méi)有檢測(cè)物的透光值為100%。則實(shí)際檢測(cè)中，檢測(cè)物的透光值均在0%一100%之間。透光值的計(jì)算如下：T=(Meas—Min)/(Max—Min)其中T為透光值，Meas為檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值，Min為在0%的情況下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值，Max為在100%的情況下檢測(cè)的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：MaX=3600 Mn=20Meas=30 T=(30-20)/3600-20)=0.0028 OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552 Anthos酶標(biāo)儀的中心定位儀器會(huì)自動(dòng)對(duì)酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來(lái)檢測(cè)的不準(zhǔn)確。

在對(duì)每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測(cè)量，選取較為中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。光源的參照通道參照通道是用來(lái)校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來(lái)的影響。酶標(biāo)儀的用途和其它提示用于ELISA試劑的測(cè)定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。質(zhì)量控制質(zhì)量控制是試劑檢測(cè)的重要因素。請(qǐng)按照試劑說(shuō)明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。空白校正有一些試劑盒的說(shuō)陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來(lái)設(shè)置的，請(qǐng)按照試劑盒的說(shuō)明書要求進(jìn)行。檢測(cè)結(jié)果的解釋由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測(cè)的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測(cè)試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測(cè)結(jié)果才能比較和分析。對(duì)結(jié)果的臨床解釋請(qǐng)依照試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行。